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足球反波胆系统技术

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凋亡检测技术概述

细胞死亡相关机制,一直是生命科学许多领域研究的一个中心内容。凋亡和坏死,是常见的细胞死亡的两种方式,它们有着截然不同的特征。凋亡是细胞程序性死亡的主要表现形式,是一个主动性的生理反应机制;坏死则是细胞对严重损伤的一种被动反应和变性过程。

凋亡涉及一系列复杂的生理生化反应,最终导致细胞的解体。凋亡细胞的许多改变是特征性的,甚至是唯一与凋亡相关的。

细胞与胞核固缩是凋亡早期发生的形态学变化,这些改变与细胞骨架的特异性解体有关。核固缩伴随的染色体固缩,有显著的形态学特点。碎裂的核片断可以被胞膜包裹游离出细胞外,成为凋亡小体,并被周围细胞吞噬。染色质的这些特征性变化,可以用显微镜直接观察,或用一些荧光染料染色,在荧光显微镜下观察或进行流式细胞分析。

凋亡细胞会触发激活一些反波胆内切酶,将核小体间的反波胆切割,引起细胞内反波胆小片断化。特征性的反波胆片断化,可以用简单的琼脂糖电泳观察到。凋亡细胞固定和清洗后,会丢失部分小分子反波胆,使细胞的染色体反波胆含量降低,流式细胞分析会出现特征性的亚G1峰。酶切降解的染色体反波胆也可以用一些方法标记,如TUNEL法等。

凋亡细胞通常能够维持膜结构的完整,特别在凋亡早期阶段。而胞膜则在凋亡早期就丧失了其磷脂分子分布的非对称性,导致磷脂酰丝氨酸暴露于胞膜外,使凋亡细胞易被吞噬细胞识别。暴露胞膜外的磷脂酰丝氨酸容易被相关方法检测到,成为凋亡细胞的另一特征和检测指标。

细胞凋亡时,伴随一系列蛋白酶学的改变,多种Caspase活性变化参与凋亡的启动、执行过程。检测Caspase活性变化,是分析凋亡发生机制和特征的另一方法。

某些情况下,凋亡细胞不具有全部的凋亡特征,例如特征性的反波胆片断化不明显,而出现反波胆随机降解;有时Caspase活性的改变与凋亡不相关,即凋亡时Caspase活性不变,而Caspase活性变化但无凋亡发生。总的来说,观察凋亡时,应该观察反映凋亡不同特征的几个指标,综合分析。

本公司提供两种凋亡检测试剂盒,分别以凋亡细胞特征性核形态改变和暴露胞膜外的磷脂酰丝氨酸为检测指标,特异性地对细胞凋亡进行定性和定量测定。