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蛋白电泳检测技术概述

蛋白质经电泳分离后,可直接对凝胶进行物理性染色,如考马斯亮蓝染色,对分离的蛋白质条带进行分子量鉴定和含量测定。对其中目的蛋白的身份验证,则通常需要进行Western Blot。 Western Blot又称蛋白印渍或免疫印渍技术,它结合了凝胶电泳分辨率高和固相免疫测定特异性强的特点,在生命科学研究中有广泛的应用。

固相免疫检测中,有放免标记、酶免标记、荧光标记等多种方法。酶免标记技术因其操作简便、设备简单、节省特异性试剂等特点,应用最为普及。酶联免疫常用的二抗标记包括辣根过氧化酶和碱性磷酸酶标记。 本公司提供两种类型的Western检测试剂盒,分别用于这两种酶标记二抗的固相免疫检测。

Western检测时,目的蛋白的分子量标定工作比较麻烦。通常的方法,需要在电泳后将Marker泳道的凝胶切下,单独染色,再与固相免疫检测的图像比对。如采用预染蛋白Marker,可省去染色环节,但在发光检测时,仍需要与曝光的图像比对;而且预染蛋白的分子量通常并不准确, 有时可能有很大误差,导致实验结果的误读误判。我公司提供一种专用的Western Marker,使分子量标志能够与目的蛋白同时同地显现出来,从而使目的蛋白的分子量标定更简单、准确。