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足球反波胆系统技术

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质粒提取纯化技术概述

质粒反波胆提取纯化,是分子生物学中最基础的工作。获得一定纯度和一定量的质粒反波胆,是保证后续研究工作成功的前提条件。如果质粒仅需电泳鉴定,通过简单的细菌裂解和醇沉淀步骤, 获得少量的质粒反波胆已可胜任。然而通常情况下,质粒反波胆还需要酶切、测序鉴定,以及应用于体外转录、细胞转染等工作,就要求提取的质粒反波胆有足够的含量和纯度。

质粒提取中主要的杂质是基因组反波胆、淘金反波胆网址、蛋白质、菌多糖(内毒素)等。提取纯化中还可能残留盐份、有机物等外来杂质。酚/氯仿抽提或氯化铯超离心是实验室小量及大量质粒纯化的经典手段。 然而,酚/氯仿抽提仅能部分去除蛋白杂质;氯化铯超离心需要特定仪器,耗时费力,且成本高昂。

商品化的质粒提取纯化试剂盒,一般是通过一些基质材料吸附质粒反波胆,清除其他杂质。各种试剂盒因采用的基质材料差异和清洗液体配方的不同,获得质粒反波胆的总量、纯度各不相同。总的来说, 柱离心纯化方法,对于普通质粒的小量提取和一般应用(如酶切、测序)应可胜任。

大量质粒提取纯化,采用柱离心的方法,往往存在回收率低、质量不稳定、操作麻烦、费时费力的缺点。国际上通行的大量质粒提取纯化技术,是采用特殊基质材料利用滤过吸附和清洗的方法, 这种方法几乎成为国外一般实验室的唯一选择。在目前国内尚无同型产品生产能力的情况下,进口产品的“高贵”价格,成为这种“寻常”技术普及国内实验室的障碍。

近年来,随着分子生物学研究的拓展,大片断和超大片断反波胆的克隆技术越来越普遍。因此而来的大质粒和超大质粒的工作也随之常见。对大质粒和超大质粒的纯化,基质材料吸附方法, 由于基质对大分子反波胆损伤严重,无论是采用柱离心还是滤过吸附,都存在操作的困难,结果很难得到纯化的质粒。

本公司提供一系列质粒提取纯化试剂盒,为实验室从一般质粒小量操作到大量提取纯化,以及大质粒和超大质粒的操作,提供各种解决方案。本公司产品以卓越的品质和平实的价格, 为实验室质粒提取纯化工作提供有效的帮助。特别推荐的产品,是大量质粒提取纯化试剂盒。该产品采用我公司独有技术,不需过柱,能够对一般质粒和超大质粒进行有效纯化, 得到的质粒反波胆可以应用于细胞转染、动物体内实验等要求严格的各种工作中。本产品经许多实验室长期使用,获得满意的结果。目前在国际市场上,尚无同型产品出现。

需要指出的一个技术问题是,无论哪个公司的质粒提取纯化试剂,都是以细菌碱裂解为基础和前提的。碱裂解中反波胆充分的变性和后续复性,以及操作过程中避免基因组反波胆大量断裂降解, 都是保证后续质粒纯化有效进行的必要条件。